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多抗和单抗的优缺点比较

2022-01-12

    多克隆抗体(多抗)能识别任一抗原上的多个表位,而单克隆抗体(单抗)仅检测任一抗原上的一个表位(如下图)。但是多抗单抗两者有着属于各自的优点和缺点。今天北京启维益成要给朋友们说的正是多抗单抗的差异。

    多克隆抗体的优点:

    1. 多克隆抗体可有助于放大低表达水平的靶蛋白信号,因为靶蛋白可在多个表位上结合不止一个抗体分子。但是这会给定量实验造成不利影响,因为结果将变得不准确

    2. 由于能识别多个表位,多克隆抗体可在IP/ChIP中得到更好的结果。

    3. 比单克隆抗体更能容许抗原中的微小变化。

    4. 它们会识别出与免疫原蛋白质具有高同源性的蛋白质,或者从非免疫原物种的组织样品中筛选靶蛋白,例如当未测试物种中的抗原性质未知时,有时会使用多克隆抗体。这也使得检测免疫原序列以确定是否有任何交叉反应性非常重要。

    5. 多克隆抗体通常是检测变性蛋白质的首选。

    6. 多表位通常可提供更为有力的检测。

    7. 多克隆抗体不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常可识别多个结构域。

 

    不足之处:

    1·易于产生批次间差异。

    2·产生大量非特异性抗体,有时可能在某些应用中产生背景信号。

    3·多表位使得检测免疫原序列以确定是否有任何交叉反应性非常重要。

 

    客观事实:

    1. 识别任一抗原上的多个表位。获得的血清将包含不同亲和力抗体的异质复合体混合物。

    2. 多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。

    3. 肽免疫原通常用于产生靶向唯一表位的多克隆抗体,特别适合高同源性的蛋白家族。

 

    抗体制备:

    1. 制备所需技术和技能不高。

    2. 制备时间短。

    3. 多克隆抗体不适用于探测抗原的特定结构域,因为多克隆抗血清通常可识别多个结构域。

 

    单克隆抗体优点:

    1. 杂交瘤制得后,就成为了恒定的再生源,所有批次都将相同–对确保实验步骤和结果的一致性和标准化非常有帮助。

    2. 单克隆抗体通常在切片和细胞染色造成的背景较低。因为它们以更强特异性检测一个靶表位,所以不太可能与其它蛋白质发生交叉反应。

    3. 由于具有特异性,单克隆抗体非常适于用作分析测定中的一抗,或者用于检测组织中的抗原,并且通常所产生的背景染色显著低于多克隆抗体。

    4. 与多克隆抗体相比,单克隆抗体的同质性非常高。如果实验条件保持不变,单克隆抗体的各实验结果重现性很高。

    5. 单克隆抗体的特异性能使其在混合物中和抗原高效地结合。

 

    不足之处:

    1·可产生大量特异性抗体,但是可能特异性过强。

    2·经过抗原的化学处理后比多克隆抗体更易于丢失表位。这可通过使用同一抗原的两个或多个单克隆抗体进行补偿。

 

    客观事实:

    1. 仅检测抗原上的一个表位。

    2. 它们仅由一个抗体亚型组成。在需要二抗进行检测时,应针对正确的亚类选择抗体。

  

    抗体制备:

    1. 需要高技术。

    2. 需要先培训才能使用技术。

    3. 制备杂交瘤耗时长。