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       收集完蛋白样品后，为确保每个蛋白样品的上样量一致，需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同，需要采用适当的蛋白浓度测定方法。

       常用的蛋白定量方法有：BCA法和Bradford法，其中BCA法比Bradford法灵敏度更高（BCA法灵敏度为0.5-20ug/mL，Bradford法灵敏度为1-20ug/mL），并且抗干扰能力更强，线性条件更好，所以一般推荐选用BCA法。

       BCA法原理：碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+，Cu+与二喹啉酸（BCA）形成紫色的络合物，吸光强度与蛋白浓度成正比。测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。

       Bradford法原理：考马斯亮蓝G-250和溶液中的蛋白质结合形成复合物，未结合的G-250有4种不同的离子形式，较蓝的阴离子和蛋白质结合，在595nm处有吸光度，测定其在595nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。